Video: Կա՞ն արդյոք այլ մեթոդներ PCR արտադրանքները մաքրելու համար:
2024 Հեղինակ: Miles Stephen | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-15 23:37
Այն հավելվածների համար, որոնք պահանջում են ՊՇՌ մաքրում կամ վավերացում ՊՇՌ արդյունքները, այնտեղ երկուսն են մեթոդները ընդհանուր առմամբ հետևում են. PCR արտադրանք մեկուսացում օգտագործելով սյունակ և գել մաքրում ագարոզայի գելից:
Այստեղ ի՞նչ տեսակի քրոմատոգրաֆիա է օգտագործվում PCR արտադրանքները մաքրելու համար:
PCR արտադրանքները մաքրելու համար օգտագործվում է չափի բացառման քրոմատոգրաֆիա: Սա թակարդում է փոքր մոլեկուլները, ինչպիսիք են սպիտակուցը, այբբենարաններ և նուկլեոտիդները, մինչդեռ PCR արտադրանքի նման մեծ մոլեկուլները չափազանց մեծ են ուլունքների մեջ մտնելու և սյունակի միջով հավաքման խողովակների մեջ անցնելու համար:
Բացի այդ, ինչպե՞ս եք մաքրում ԴՆԹ-ն: Հիմնականում դուք կարող եք մաքրել քո ԴՆԹ նմուշներ՝ լիզացնելով ձեր բջիջների և/կամ հյուսվածքների նմուշները՝ օգտագործելով ամենահարմար ընթացակարգը (մեխանիկական խանգարում, քիմիական բուժում կամ ֆերմենտային մարսողություն), մեկուսացնելով նուկլեինաթթուները դրա աղտոտիչներից և նստեցնելով այն համապատասխան բուֆերային լուծույթում:
Բացի այդ, ինչու ենք մենք մաքրում PCR արտադրանքը:
Մաքրում ԴՆԹ-ից ա ՊՇՌ ռեակցիան սովորաբար անհրաժեշտ է ներքևում օգտագործման համար և հեշտացնում է ֆերմենտների, նուկլեոտիդների, պրայմերների և բուֆերային բաղադրիչների հեռացումը: Սովորաբար օգտագործվող մեթոդները օգտագործում են պտտվող սյուներ, որոնք պարունակում են սիլիցիումի մատրիցա, որոնց ԴՆԹ-ն կարող է ընտրովիորեն կապված լինել քաոտրոպ աղերի առկայության դեպքում:
Ինչու՞ պետք է մաքրվի ԴՆԹ-ն:
Մենք մաքուր վերև ԴՆԹ ջրային լուծույթներից հեռացնելու բուֆերային աղերը, ֆերմենտները կամ այլ նյութերը, որոնք կարող են ազդել հոսանքն ի վար կիրառման վրա: Օրինակները ներառում են PCR ռեակցիա մաքուր վերև, մաքուր սահմանափակումից հետո մարսում և մաքուր մինչև գենոմային կամ պլազմիդ ԴՆԹ աղտոտված է բջջային սպիտակուցներով/բեկորներով:
Խորհուրդ ենք տալիս:
Ի՞նչ մեթոդներ կարող են օգտագործվել ձեր վերականգնված յուրաքանչյուր բաղադրիչի մաքրությունը որոշելու համար:
Առավել պարզ քիմիական մեթոդները ներառում են գրավիմետրիա և տիտրացիա: Կան նաև ավելի առաջադեմ լուսային կամ սպեկտրոսկոպիկ մեթոդներ, ինչպիսիք են՝ UV-VIS սպեկտրոսկոպիան, միջուկային մագնիսական ռեզոնանսը և ինֆրակարմիր սպեկտրոսկոպիան: Կարող են օգտագործվել նաև քրոմատագրման մեթոդներ, ինչպիսիք են գազային և հեղուկ քրոմատոգրաֆիան
Ի՞նչ մեթոդներ են օգտագործվում էկզոմոլորակներ գտնելու համար:
Հետևյալ մեթոդները գոնե մեկ անգամ հաջող են ապացուցել նոր մոլորակ հայտնաբերելու կամ արդեն հայտնաբերված մոլորակ հայտնաբերելու համար. Ճառագայթային արագություն: Տարանցիկ ֆոտոմետրիա. Արտացոլման/արտանետումների մոդուլյացիաներ. Հարաբերական ճառագայթում. Էլիպսոիդային տատանումներ. Պուլսարի ժամանակավորում. Փոփոխական աստղային ժամանակացույց: Տարանցման ժամանակացույց
Ինչու՞ է սուբլիմացիան օգտագործվում կոֆեինը մաքրելու համար:
Արտադրանքը, որը հավաքվում է արդյունահանումից հետո, դեռ շատ կեղտեր ունի։ Նմուշը մաքրելու եղանակներից մեկն է սուբլիմացիան, քանի որ կոֆեինը կարող է ուղղակիորեն պինդից գոլորշի անցնել և հակադարձել՝ առանց հեղուկ փուլ անցնելու:
Ինչպե՞ս է սուբլիմացիան օգտագործվում նյութը մաքրելու համար:
Sublimation-ը քիմիկոսների կողմից օգտագործվող միացությունների մաքրման տեխնիկա է: Կոշտ նյութը սովորաբար տեղադրվում է սուբլիմացիոն ապարատի մեջ և տաքացվում վակուումի տակ: Այս նվազեցված ճնշման ներքո պինդ նյութը ցնդում և խտանում է որպես մաքրված միացություն սառեցված մակերեսի վրա (սառը մատի վրա)՝ թողնելով կեղտերի ոչ ցնդող մնացորդներ։
Ի՞նչ մեթոդներ են օգտագործվում մարդաբանության մեջ:
Չորս ընդհանուր որակական մարդաբանական տվյալների հավաքագրման մեթոդներն են՝ (1) մասնակիցների դիտարկումը, (2) խորը հարցազրույցները, (3) ֆոկուս խմբերը և (4) տեքստային վերլուծությունը: Մասնակիցների դիտարկում. Մասնակիցների դիտարկումը մարդաբանության մեջ դաշտային աշխատանքի հիմնական մեթոդն է