Արդյո՞ք Cre lox-ը շրջելի է:

2024 Հեղինակ: Miles Stephen | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-15 23:37

Բոլոր ռեկոմբինացիոն իրադարձությունները միջնորդավորված FLP կամ Cre են շրջելի . Մինչդեռ ԴՆԹ-ի մի կտորի հեռացումը կողքից loxP /FRT կայքերը նախընտրելի են դրա վերաներդրման նկատմամբ, ինվերսիան և նորից ինվերսիան տեղի են ունենում նույն հավանականությամբ: Այն loxP և FRT թիրախային կայքերը նախագծվել են՝ խուսափելու այս կրկնակի շրջման խնդրից:

Հետո, ինչպե՞ս է աշխատում CRE LOX-ը:

Cre - Լոքս ռեկոմբինացիան ներառում է ԴՆԹ-ի որոշակի հաջորդականության թիրախավորումը և դրա միացումը ֆերմենտի օգնությամբ, որը կոչվում է. Cre recombinase . Այն Cre սպիտակուցը կայքի հատուկ ԴՆԹ է ռեկոմբինազ որը կարող է կատալիզացնել ԴՆԹ-ի վերամիավորումը ԴՆԹ-ի մոլեկուլի հատուկ տեղամասերի միջև:

Բացի այդ, ի՞նչ է անում Cre recombinase-ը: Cre recombinase է մի թիրոզին ռեկոմբինազ P1 բակտերիոֆագից ստացված ֆերմենտ: Ֆերմենտը (38 կԴա) է Կայքի հատուկ ինտեգրազների ընտանիքի անդամ ռեկոմբինազ և այն է հայտնի է, որ կատալիզացնում է տեղանքի հատուկ ռեկոմբինացիայի իրադարձությունը երկու ԴՆԹ-ի ճանաչման տեղամասերի միջև (LoxP կայքեր):

Այս առնչությամբ, ինչպե՞ս է տամոքսիֆենը հրահրում Cre-ն:

Տամոքսիֆեն վարչակազմը դրդում է Cre recombinase արտահայտությունը α-MHC խթանողի տակ, որը նման է վերը նշված մկների արտահայտությանը, որը հնարավորություն է տալիս սրտի մկաններին հատուկ Dicer-ի ջնջումը որոշակի ժամանակում:

Որոնք են loxP կայքերը:

LoxP կայքեր ուղղորդված 34 bp հաջորդականություններ են, որոնք կազմված են երկու 13 bp ճանաչումից կայքեր բաժանված է 8 bp spacer շրջանով: Հերթականությունները բնականաբար չեն հանդիպում այլ հայտնի գենոմներում, բացի P1 բակտերիոֆագից, և բավական երկար են, որ հազիվ թե պատահական լինեն: