Ինչպե՞ս եք դուրս բերում ԴՆԹ-ն բջիջից:

2024 Հեղինակ: Miles Stephen | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-15 23:37

ԴՆԹ կարող է լինել արդյունահանված բազմաթիվ տեսակներից բջիջները . Առաջին քայլն այն է, որ լուծարվի կամ բացվի բջիջ . Դա կարելի է անել բլենդերի մեջ մի կտոր հյուսվածք մանրացնելով: Այն բանից հետո, երբ բջիջները կոտրվել են, ավելացվում է աղի լուծույթ, ինչպիսին է NaCl-ը և SDS (նատրիումդոդեցիլ սուլֆատ) միացությունը պարունակող լվացող միջոց:

Հարց է առաջանում նաև՝ որո՞նք են ԴՆԹ-ի արդյունահանման 4 քայլերը:

Չորս քայլ է օգտագործվում մնացած բջջի ԴՆԹ-ի հեռացման և մաքրման համար:

• Լիզիս.
• Տեղումներ.
• Լվանալ.
• Վերակասեցում.

Բացի այդ, քանի՞ բջիջ է անհրաժեշտ ԴՆԹ-ի արդյունահանման համար: Միջինը 6 մգ ԴՆԹ 200 մգ-ից մարդու ամբողջական արյուն և մինչև 20 մգ 5x10-ից⁶լիմֆոցիտներ, 25-50 մգ կաթնասունների հյուսվածք կամ 10⁴-10⁸ կուլտուրական բջիջները կարող է լինել արդյունահանված . Այս փաթեթը չի օգտագործում սովորական մեթոդը ԴՆԹ-ի մեկուսացում և չի պահանջում ֆենոլ/քլորոֆորմ արդյունահանում կամ էթանոլային տեղումներ:

Հաշվի առնելով սա՝ ինչպե՞ս եք ԴՆԹ-ն արդյունահանում մրգի բջիջներից:

Պահանջվող նյութեր

1. Մրգեր – Կիվին, ելակը և բանանը լավ են աշխատում:
2. 5 գ լվացքի հեղուկ։
3. 2 գ աղ։
4. 100 մլ ծորակ ջուր։
5. 100 մլ սառցե սպիրտ (իզոպրոպիլային սպիրտ սովորաբար կարելի է գտնել դեղագործների մոտ); փորձարկումն սկսելուց առաջ դրեք սառնարանում առնվազն 30 րոպե:
6. Տաք ջրի հասանելիությունը՝ մոտ 60 °C:

Ի՞նչ քիմիական նյութեր են օգտագործվում ԴՆԹ-ի արդյունահանման մեջ:

SDS, CTAB, ֆենոլ, քլորոֆորմ, իզոամիլ սպիրտ, Triton X100, գուանիդիումի թիոցիանատ, տրիս և EDTA մի քանի տարածված են: օգտագործված քիմիական նյութեր լուծման վրա հիմնված ԴՆԹ արդյունահանում մեթոդ.