Բովանդակություն:
Video: Ինչպե՞ս եք բեռնում գելային էլեկտրոֆորեզը:
2024 Հեղինակ: Miles Stephen | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-15 23:37
Նմուշների բեռնում և ագարոզայի գելի գործարկում
- Ավելացնել բեռնում բուֆեր ձեր ԴՆԹ-ի յուրաքանչյուր նմուշի համար:
- Պնդանալուց հետո տեղադրեք ագարոզան գել մեջ գել տուփ ( էլեկտրոֆորեզ միավոր):
- Լրացնել գել տուփ 1xTAE (կամ TBE) մինչև գել ծածկված է.
- Զգուշորեն ծանրաբեռնվածություն մոլեկուլային քաշով սանդուղք դեպի առաջին գիծ գել .
Ինչ վերաբերում է դրան, որքան ԴՆԹ պետք է բեռնել գելային էլեկտրոֆորեզի համար:
Գումարը ԴՆԹ-ն բեռնելու համար մեկ ջրհորի համար փոփոխական է: Նվազագույն գումարը ԴՆԹ որը կարելի է հայտնաբերել էթիդում բրոմիդով, 10 նգ է: ԴՆԹ մինչև 100 նգ մեկ ջրհորի չափաքանակները կհանգեցնեն սուր, մաքուր ժապավենի վրա, որը ներկված էթիդիումի բրոմիդով գել.
Բացի այդ, ինչո՞ւ է ջրի փոխարեն բուֆեր օգտագործում գելային էլեկտրոֆորեզում: Այն բուֆեր անհրաժեշտ է ԴՆԹ-ի լուծույթի pH-ը չեզոք մակարդակին մոտ պահպանելու համար, քանի որ եթե այն կարող է թթվային դառնալ էլեկտրոլիզի միջոցով: Էլեկտրոդների առաջացրած էլեկտրական հոսանքները կարող են առաջացնել ջուր մոլեկուլներ՝ H+ իոնները տարանջատելու և ազատելու համար:
Մարդիկ նաև հարցնում են՝ ինչո՞ւ է գելային էլեկտրոֆորեզում մարկեր օգտագործում։
Փոքր բեկորները շարժվում են ավելի արագ, և հետևաբար ավելի հեռու, քան ավելի մեծ բեկորները, երբ նրանք օձի միջով անցնում են գել . Ինչու է օգտագործվում մարկեր երբ բեկորները անցնում են միջով գել ? Ա մարկեր պարունակում է հայտնի չափի ԴՆԹ բեկորներ: Մարկերներ վազում են ամեն գել մյուսների անհայտ հատվածների հետ համեմատելու համար գել ուղիները.
Որքա՞ն ԴՆԹ կարելի է տեսնել ագարոզայի գելի վրա:
Մեծ մասը ագարոզայի գելեր կատարվում են 0,7%-ից 2%-ի սահմաններում: 0.7% գել կամք ցույց տալ լավ տարանջատում (բանաձև) մեծ ԴՆԹ բեկորներ (5–10 կբ) և 2% գել կամք ցույց տալ լավ լուծում փոքր բեկորների համար (0,2–1 կբ):
Խորհուրդ ենք տալիս:
Ինչպե՞ս եք նմուշը բեռնում սյունակային քրոմատոգրաֆիայում:
Սյունակը բեռնելու համար. Նմուշը լուծեք լուծիչի նվազագույն քանակով (5–10 կաթիլ): Օգտագործելով խողովակ կամ ներարկիչ հաստ ասեղով, նմուշը կաթել ուղղակիորեն սիլիցիումի վերին մասում: Ամբողջ նմուշը ավելացնելուց հետո թողեք, որ սյունը ցամաքեցվի, որպեսզի լուծիչի մակարդակը դիպչի սիլիցիումի վերին մասին:
Ինչպե՞ս են օրգանական միացությունները ստացել իրենց անվանումը Ինչպե՞ս է բառը կապված իր նշանակության հետ:
Ինչպե՞ս է բառը կապված իր նշանակության հետ: Organic Compounds-ն իր անվանումն ստացել է ածխածնային կապերի քանակից: Բառը կապված է իմաստի հետ, քանի որ այն կապված է օրգանական միացություններում ածխածնի ատոմների կապերի հետ
Ո՞րն է գելային էլեկտրոֆորեզի նպատակը:
Հիմնական կետերը. Գելային էլեկտրոֆորեզը մեթոդ է, որն օգտագործվում է ԴՆԹ-ի բեկորները ըստ դրանց չափի առանձնացնելու համար: ԴՆԹ-ի նմուշները բեռնվում են գելի մի ծայրում գտնվող հորերի մեջ, և էլեկտրական հոսանք է կիրառվում՝ դրանք գելի միջով քաշելու համար: ԴՆԹ-ի բեկորները բացասական լիցքավորված են, ուստի շարժվում են դեպի դրական էլեկտրոդ
Ո՞ր գործոնն է օգտագործում գելային էլեկտրոֆորեզը ԴՆԹ-ի մոլեկուլների վիկտորինա առանձնացնելու համար:
Գելը գործում է մաղի պես՝ առանձնացնելով ԴՆԹ-ի տարբեր մոլեկուլներ՝ ըստ դրանց չափի, քանի որ ավելի փոքր ԴՆԹ մոլեկուլները կկարողանան ավելի արագ շարժվել գելի միջով, քան ավելի մեծ մոլեկուլները: Գելի մեջ պարունակվող քիմիական նյութը, որի միջով անցնում է ԴՆԹ-ն, կապվում է ԴՆԹ-ին և տեսանելի է ուլտրամանուշակագույն լույսի ներքո
Ի՞նչ է դրական և բացասական հսկողությունը գելային էլեկտրոֆորեզում:
Դրական և բացասական հսկիչները նմուշներ են, որոնք օգտագործվում են գել էլեկտրոֆորեզի փորձի վավերականությունը հաստատելու համար: Դրական հսկիչները նմուշներ են, որոնք պարունակում են ԴՆԹ-ի կամ սպիտակուցի հայտնի բեկորներ և որոշակի ճանապարհով գաղթելու են գելի վրա: Բացասական վերահսկողությունը նմուշ է, որը չի պարունակում ԴՆԹ կամ սպիտակուց