Ո՞րն է փոխակերպման արդյունավետության բանաձևը:

2024 Հեղինակ: Miles Stephen | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-15 23:37

Այն կարելի է հաշվարկել հաջող փոխակերպիչների թիվը բաժանելով ա-ի ժամանակ օգտագործվող ԴՆԹ-ի քանակի վրա վերափոխում ընթացակարգը.

Հետևաբար, ո՞րն է նորմալ փոխակերպման արդյունավետությունը:

Սա բաժանվում է ԴՆԹ-ի քանակի վրա, որն օգտագործվում է ԴՆԹ-ում վերափոխում և արտահայտվում են որպես տրանսֆորմատորներ ԴՆԹ-ի մեկ միկրոգրամի դիմաց: Փոխակերպման արդյունավետություն 10^6-ի և 10^9-ի միջև ներկայացնում է նորմալ միջակայք իրավասու E. coli բջիջների համար:

Հետագայում հարց է առաջանում՝ ո՞րն է E coli-ի փոխակերպման արդյունավետությունը: Փոխակերպման արդյունավետություն սահմանվում է որպես գաղութներ ձևավորող միավորների քանակ (cfu), որոնք կարտադրվեն վերափոխող 1 մկգ պլազմիդ կոմպետենտ բջիջների տվյալ ծավալի մեջ: Տերմինը որոշակիորեն ապակողմնորոշիչ է, քանի որ 1 մկգ պլազմիդը հազվադեպ է իրականում վերափոխված.

Նմանապես, ո՞ր գործոններն են ազդում փոխակերպման արդյունավետության վրա:

Փոխակերպման արդյունավետության վրա ազդող գործոններն են լարում -ից բակտերիաներ , բակտերիաների գաղութի աճի փուլը, կազմը փոխակերպման խառնուրդի և չափը և դրսի վիճակը ԴՆԹ.

Արդյո՞ք բակտերիաների վերափոխումը արդյունավետ է:

Ազդող գործոններ Փոխակերպման արդյունավետություն Այն վերափոխում ռեակցիան է արդյունավետ երբ օգտագործվում է <10 նգ ԴՆԹ: pUC19 ԴՆԹ (0.1 նգ) հարմար է որպես հսկիչ: Գերոլորված ԴՆԹ-ն ամենաշատն է արդյունավետ համար վերափոխում համեմատած գծային կամ ssDNA-ի հետ, որն ունի վերափոխման արդյունավետությունը <1%-ից: