Ինչպե՞ս եք գտնում ԴՆԹ-ի կոնցենտրացիան աբսորբացիայից:

2024 Հեղինակ: Miles Stephen | [email protected]. Վերջին փոփոխված: 2023-12-15 23:37

ԴՆԹ-ի կոնցենտրացիան գնահատվում է չափելով կլանումը 260 նմ-ում՝ կարգավորելով Ա₂₆₀ պղտորության չափում (չափվում է կլանումը 320 նմ-ում), բազմապատկելով նոսրացման գործակցով և օգտագործելով այն հարաբերությունը, որ Ա₂₆₀ 1,0 = 50 մկգ/մլ մաքուր dsDNA:

Նմանապես, մարդիկ հարցնում են՝ ինչպե՞ս եք գտնում ԴՆԹ-ի կոնցենտրացիան:

Բնօրինակ նմուշում ԴՆԹ-ի կոնցենտրացիան որոշելու համար կատարեք հետևյալ հաշվարկը

1. dsDNA կոնցենտրացիան = 50 μg/mL × OD₂₆₀ × նոսրացման գործակից:
2. dsDNA կոնցենտրացիան = 50 մկգ / մլ × 0,65 × 50:
3. dsDNA կոնցենտրացիան = 1.63 մգ/մլ:

Բացի այդ, ո՞րն է ԴՆԹ-ի լավ կոնցենտրացիան: Ա լավ որակ ԴՆԹ նմուշը պետք է ունենա Ա₂₆₀/Ա₂₈₀ հարաբերակցությունը 1,7-2,0 և Ա₂₆₀/Ա₂₃₀ հարաբերակցությունը 1,5-ից ավելի է, բայց քանի որ տարբեր տեխնիկայի զգայունությունը այս աղտոտիչների նկատմամբ տարբեր է, այս արժեքները պետք է ընդունվեն միայն որպես ձեր նմուշի մաքրության ուղեցույց:

Այս կերպ ԴՆԹ-ն կլանում է 280 նմ.

Կլանման հարաբերակցությունը 260 է նմ ընդդեմ 280 նմ է սովորաբար օգտագործվում է գնահատելու համար ԴՆԹ սպիտակուցային լուծույթների աղտոտում, քանի որ սպիտակուցները (մասնավորապես՝ արոմատիկ ամինաթթուները) կլանել լույս ժամը 280 նմ.

Ինչպե՞ս եք օգտագործում NanoDrop-ը ԴՆԹ-ի կոնցենտրացիայի համար:

Հիմնականում նանո կաթիլ տալիս է ընտրության հնարավորություն ԴՆԹ , ՌՆԹ, սպիտակուցներ. Դուք պետք է ընտրեք ԴՆԹ , ապա դրեք 2 ՄԼ ջուր (նախընտրելի mili Q) ընտրեք «Դատարկ», որից հետո տեղադրեք ևս 2 մլ ջուր՝ հաստատելու համար, որ չափումը 0 է: Այնուհետև տեղադրեք ձեր նմուշից 2 մլ: Դուք կստանաք չափումը: